公司名稱：南京康佰生物科技有限公司
地址:南京市雨花區長虹路222號
郵編：
電話：025-86880024
手機: 18066071954
聯系人: 蔣
傳真：
E-mail: duhaitao@cobioer.com
地址:南京市雨花區長虹路222號
郵編：
電話：025-86880024
手機: 18066071954
聯系人: 蔣
傳真：
E-mail: duhaitao@cobioer.com
技術文章
當前位置：首頁 > 技術文章
激酶細胞株保存和應用
點擊次數：1033 發布時間：2019-09-23
激酶細胞株于原代凍存或復蘇培養（這個細胞提供的周期會長點，少則半個月，多則一兩個月）。每管含有細胞數>5×100000cells/ml，此細胞通過免疫熒光染色驗證，經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。細胞可以達到10倍增。
激酶細胞株被污染了，不要試圖去除污染（非常重要的細胞株才考慮去除污染），一般的原則是應將污染的細胞棄去。
1)細菌污染的排除：可使用大劑量抗生素沖擊法，向污染的細胞培養液中加入大劑量的抗革蘭氏陽性和陰性細菌的抗生素，一般采用5～10倍于常用量進行用藥，加入高濃度抗生素后作用24-48小時，再換入常規的培養液，有時可以奏效。
2)支原體的排除：卡那霉素、慶大霉素、支原體去除因子(MRA)、卷須霉素及BM-Cycline等對抗支原體是有活性的，可使用它們抑制或消除支原體。
激酶細胞株傳代：
1.培養皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養基吸掉。
3.加適當的胰蛋白酶（能覆蓋細胞就行），消化1-2分鐘。
4.細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養基終止消化。
5.用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。
6.把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養基，把細胞都吹起來。
8.根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。繼續培養。
激酶細胞株保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入 CO2 細胞培養箱內靜置后 2-3h ，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、 -80℃ 冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
上一篇 Vero細胞介紹 下一篇 細胞傳代的操作步驟 你學會了嗎？