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辨別激酶細胞株是否造假的方法
點擊次數:1149 發布時間:2019-06-24
激酶細胞株脂肪細胞在能量儲存和代謝過程中有著重要的作用。脂肪細胞分化是一個發展的過程,它對代謝穩態和營養信號很重要。它由復雜的過程控制,如基因表達和信號轉導。
激酶細胞株產品優勢:
a. 基因變化背景單一可控,細胞生存依賴*轉基因導入的活化激酶,不存在脫靶現象,能夠更加準確快速地表明藥物的作用機制。
b. 結合高通量藥物篩選平臺,實現了批量化合物靶點檢測與選擇性評價,檢測藥物的靶點選擇性,評價藥物毒副反應。
如果購買了兩盒同一公司的激酶細胞株A和B,利用交叉實驗即可辨別激酶細胞株是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個細胞株檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造細胞株。
(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個細胞株檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的細胞株。
激酶細胞株被污染了,不要試圖去除污染(非常重要的細胞株才考慮去除污染),一般的原則是應將污染的細胞棄去。
1)細菌污染的排除:可使用大劑量抗生素沖擊法,向污染的細胞培養液中加入大劑量的抗革蘭氏陽性和陰性細菌的抗生素,一般采用5~10倍于常用量進行用藥,加入高濃度抗生素后作用24-48小時,再換入常規的培養液,有時可以奏效。
2)支原體的排除:卡那霉素、慶大霉素、支原體去除因子(MRA)、卷須霉素及BM-Cycline等對抗支原體是有活性的,可使用它們抑制或消除支原體。
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